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非特异性结合和基体效应交叉反应密切相关现象
      
  但是,也有差异,这些效应的分子起源。这些差异在日常实验室程序很少被注意到。如果交叉反应物是已知的,有竞争的交叉反应物的浓度可以测量它的交叉反应性,那么这的确是一个交叉反应。在非特异性结合的情况下,比目标分析物的浓度远远高于物质都存在。这些可以是清蛋白或免疫球蛋白,或什至表面,如ELISA孔或Western印迹膜的固定化抗体的蛋白质阵列或斑点11
  基质效应的术语是用来表示试样和影响的靶分析物的测量的过程中出现的所有组件的所有干扰的影响。13的总和,如果实际的分子造成的影响是不确定的,但已知的来自试样,那么它被称为基体效应。样的效果和其他之间的边界是灵活的,有时不明确。有些基质效应派生从antianimal抗体,其他内源性干扰的结果,或只是引起的试样的粘度,pH值,或盐的浓度。
  内源性标本组件原因
  即使是自然存在的蛋白质样品中的免疫测定法可干扰。一些众所周知的干扰物质的人血清白蛋白,补体因子,溶菌酶,α-1抗胰蛋白酶,血纤维蛋白原。4的低分子量的分析物,可以与白蛋白结合。这使得难以分析物的抗体。此外,许多激素运输蛋白结合,导致空间位阻的检测。因此,确定激素免疫诊断试剂是公知的,具有高的变异系数。
  此外,许多蛋白能够结合其他物质,这是其生物功能的一部分。白蛋白,补体,和C-反应蛋白是天然的受体为许多物质。非特异性结合和交叉反应是表达他们的生物学功能,但可能会干扰检测。内源性蛋白可以结合的检测抗体,作为一个干扰因素,或可能掩盖了目标分析物。溶菌酶,例如,非特异性结合的大多数蛋白质具有低的等电点。因此,抗体等电点为约五可以绑定,从而搭建一座桥梁之间的捕获和检测抗体形成。另一种重要的内源性成分的效果是由强烈的含脂试样的干扰。一些分析物是脂溶性的,因此,测定抗体和分析物之间的键可以由脂质的影响。
  一个通用的解决方案无论他们来自矩阵,交叉反应,从内源性物质,或从病人疾病,大多数干扰的影响有一个共同点:它们涉及到中低亲和力的结合反应在检测过程中procedure.6具体结合的检测抗体,分析物是高亲和力的结合。然而,各种绑定是否只有中低亲和力或高亲和可能会导致在相同的检测信号。
  一个通用方法,以防止这些干扰的影响,将阻止所有低收入和中等亲和力结合,而不是只有专门异嗜性抗体阻断。这可以实现通过与高严格的试验缓冲液。这种办法可以防止一切干扰影响,一步到位,但它也将产生负面影响的正确??信号检测抗体。因此,使用高严谨缓冲区是??不是一种有效的选择。高亲和力结合的检测抗体必须不会受到影响。
  之间的高亲和力结合,一方面,中低亲和力结合其他歧视在这方面的成功是很重要的。这是称为LowCross缓冲液,新开发的坦率Bioscience公司联系(Weissensberg,德国)的测定缓冲液中的行动模式。通过高亲和性结合不具有有害的影响,此缓冲区不降低高亲和力的结合剂的真实信号。但它确实大大减少中低亲和性结合。这可以防止大多数干扰效应的外观,不论是否是已知的分子的干扰源。可以用作检测缓冲液或抗体稀释液的干扰减速器。即,试样或测定抗体,或两者兼而有之,可以在此缓冲液稀释。最重要的是,测定抗体和分析物之间的结合反应发生在LowCross缓冲区。
  抗体用于免疫诊断试剂盒的检测器将被存储在长期的抗体稀释液中。因此,新的缓冲区,也可以在一个稳定的配方称为LowCross-HRP。此稳定剂溶液HRP偶联物也表现出该技术的基本尽量减少干扰的影响,当然。有了它,检测抗体可以被存储在4℃下使用的低浓度长时间。这样可以节省在测定过程中的预稀释步骤。
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