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常用标记的检测抗体的免疫分析标准的分析物与
      
  经常使用的标签是碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶(HRP),荧光染料,放射性同位素,免疫-PCR,DNA酶,很多时候。不幸的是,即使这些标签可能会导致干扰。分析通常标志着探测器抗体或,对于竞争分析,标准的分析物与一个标签。不幸的是,即使这些标签会产生干扰。
  例如,荧光染料用于标记是疏水性的,从而可以改变抗体的结合特性。另外,染料本身可以结合到其他物质。或者,该蛋白质的溶解性可能会显着降低时,用荧光染料标记。的抗原与抗体的特异结合也可造成负面影响,这会导致相对的未标记的抗体的标记抗体的亲和力降低。在这些非特异效应的染料也可以导致增加的结合的抗体,以测试的塑料表面,如ELISA板,结合到样品中的内源性蛋白,或结合到捕获抗体。在这些情况下,会发生假阳性的测量的被分析物在没有或整个试验将遭受高背景。与蛋白质阵列,单点增加的背景荧光观察。该signal-to-noise比劣化。例如,大多数荧光染料标记是疏水的,因此可以改变绑定特性的抗??体。进一步,染料本身可以绑定到其他物质或者,蛋白质的溶解度可明显降低当贴上了荧光染料。在这些情况下,假阳性测量在没有发生的分析物,或整个试验将遭受高背景。与蛋白质阵列,增加背景荧光的单点是观察。的信噪比恶化。
  同样,蛋白质或抗体结合的荧光染料,其中一些能够减少,甚至关掉,荧光染料。所有的反应发生在蛋白质阵列是非常复杂的,因为同时使用多种捕获和标记的检测抗体在一个反应体积。因此,从样品中的蛋白质或标记的抗体与单点的非特异性结合的可能性更大。涉及从样品组件,影响抗体的干扰效果更常见的是在11蛋白质阵列比传统检测。因此,蛋白质的非特异性结合的概率从样品或标记的抗体与单点是更大的。干扰的影响涉及组件从样本影响抗体更常见的蛋白质阵列比传统的化验。 11
  交叉反应或交叉反应的抗体行使的??情况下,它能够绑定目标分析物以外的结构。通常情况下,这些结构显示出极大的相似性的分析物。实施例。将代谢产物的分析物,具有类似的分子结构,和一个随机的相似性或同源性的氨基酸序列的蛋白质的化学物质。交叉反应,或交叉与场合,当抗体结合的能力结构行使其他玩具目标分析物。经常,这些结构显示一个伟大的相似性的分析物。
  交叉反应可以影响竞争力的分析,在一个非常戏剧性的方式,因为只有一个检测抗体潜在的交叉反应。4,6调查的一部分,大多数试验验证,包括验证完成时,根据FDA的指导原则是推荐12
  交叉反应,能起到显着的作用,蛋白质的检测Western印迹和免疫组化应用。这额外的频段,在染色或细胞结构变得明显。在许多情况下,这些不需要的绑定的确切的分子的原因是未知的。在Western印迹法,其原因往往会简单地是天然存在的被分析物蛋白质的降解产物。降解也可以导致从有条不紊的方法。但是,在某些情况下,这个故事的降解是不是真正的,真实的原发性或继发性的抗体的交叉反应,必须考虑到。
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