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亲和电极也可以检测事业部有竞争力的过程
      
  亲和电极也可以检测事业部有竞争力的过程未知浓度的抗生物素蛋白,在溶液中,允许竞争为有限数量的酶标记的补体分子的的电极固定化的抗生物素蛋白。这个过程被形象地表示在图2中,路径B的游离的抗生物素蛋白可有效地防止补体从与布线水凝胶中的抗生物素蛋白络合。的电流产生的H 2 O 2的电催化还原为高时,较少的补事业部存在于溶液中。的检测限低于5微克/毫升。
  在一个类似的实验中,生物素检测允许固定数目的标记的补体分子竞争与未知浓度的生物素(没有氧化还原enzymelabeled的)固定在电极上的SBU的数目有限。形象的方法,在图2中,路径C.减少酶的底物产生的电流是负相关的量的未标记的补体。检测限为10纳米以下。所有这些测定是无电极的洗涤来完成。
  到目前为止,还没有洗涤溶液中已经发现,有效地分离不破坏抗生物素蛋白与生物素结合的能力,或改变的PVI,锇金属膜的氧化还原特性的抗生物素蛋白的生物素。这样的解决方案必然是难以捉摸的,考虑到这对情侣不开,即使在极端的pH值。
  缺乏可逆性使得有必要建立校准曲线时,使用多个电极。抗体,该抗体与生物素结合在PVI,输出端电极上的凝胶的初步工作已经表明,类似的PVI-O的抗生物素蛋白膜,B-HRP结合可以跟踪在H 2 O 2还原电流的增加。然而,不像PVI -锇-抗生物素蛋白膜,其中绑定实际上是不可逆的,B-HRP可逆地结合到含抗生物素的膜。在三个周期的结合和分离,当前的再现性的增加和减少,示出该膜没有简短的循环(图4)时降低。与任何多使用的亲和生物传感器,洗衣机的序列是必需的,至少在最初结合的补体的分离和去除。
  图4。三个生物素标记的辣根过氧化物酶结合(B-HRP)的周期(A,B,和C)所示用1微升的溶液中含有2.5毫克/毫升,1毫克/毫升的山羊抗生物素PEGDGE加载免疫传感器,和1点05分01秒的比例混合,10毫克/毫升的PVI-Os。B-HRP结合事件进行了5毫升pH值7.4 PBS。的H 2 O 2浓度为0.1 mM和B-HRP浓度为1微克/毫升。该电极是在1000rpm下旋转,并保持平衡,在100毫伏相对于Ag / AgCl电极。的结合被逆转电极在pH为2的PBS洗涤2小时。
  结论
  用于直接电检测的亲和反应的发生,这种以前的工作描述了一种通用方法。一些广泛进行检测,有足够的灵敏度和检测限。微安电流测量比那些常规测量简单和廉价(50美元)的恒电位高一千倍。他们一百万倍高于电流测量与国家的最先进的低噪声电流放大器和恒电位法拉第笼。
  在竞争性测定的灵敏度上的位移曲线的形状,通常是基于电化学检测电极的大小和结合能力实际上是有限的。考虑到所有的亲和试剂被剥离从一个大的体积(5毫升)中可以看出,没有任何障碍检测千倍甚至百万少量的亲和试剂,简单地通过使用更小的电极。例如,通过使用标准的10微米直径的超微电极,可以增加灵敏度为10 5的一个因素。
  在过去的十年中,生物传感器已经被吹捧为未来的化学传感器。学术和基础研究工作蓬勃发展。在最近的一次研讨会上的生物传感和生物传感器由美国化学学会主办,250篇论文。然而,随着血糖监测的异常,实际商业产品的研发和发展之间的差距已经很少弥合。
  的生物传感器的性质限制了商业上的成功机会。亲和生物传感器将有困难的时候,竞争的技术,如标准的酶联免疫吸附试验,它可以完全自动化的,复批次96个,甚至384个样品操作。生物传感器似乎最适合有限的使用和护理点的应用。
  个人的血液glucosemonitoring业务是市场需要立即进行现场分析,而不需要高吞吐量的最好的例子。要成功商业化的亲和生物传感器,类似的利基市场将必须确定。可能的目标包括传染性疾病检测,军事应用危险化学品/微生物,细菌的食品安全监测,以及可能的基因组测试的即时检测。
  解决在有限的市场的障碍之一是难以收回产品开发成本。血糖市场是数十亿美元的强,而且可以承受主要的研发力度。的亲和生物传感器的市场这个市场上只有一小部分。一种生物传感器,战略就是适应多种分析,将具有明显的优势,散布在几个产品的开发成本。
  词汇表
  电流测定法:从氧化还原反应产生的电流的测量。
  阳极:电极发生氧化。
  抗生物素蛋白:一种糖蛋白,具有四个亚基。每个亚基有一个结合位点的生物素。
  生物素: 244分子量的维生素在组织和血液中发现。它具有高亲和力的抗生物素蛋白结合。
  阴极电极减少发生。
  调解:任何的化学物质能够酶的活性部位和电极之间的电子转移。
  氧化:氧化还原反应,涉及电子的损失。
  氧化还原酶:催化电子转移反应的酶。
  潜在的(电化学潜在):给 一个物种(氧化)或占用(减少)电子的倾向。价值永远是相对的另一反应。
  减少:涉及电子除了氧化还原反应。
  选择性结合单元(SBU):在亲和生物传感器的生物识别元件。这可能是一种抗体,抗原,DNA序列,外源凝集素,抗生物素蛋白或生物素。
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