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实验室程序样品制备的质量影响结果的质量
      
  因此,重要的是,技术人员注意细节,构成良好的实验室实践在幻灯片准备和染色。 使用自动stainers可以提高结果的一致性。 接口与埃西斯开始当技术员加载幻灯片组,每组4到航空公司专门设计的下滑。 技术员的地方多达25运营商(100幻灯片)陷入无人值守的系统分析(见图2)。当技术员介绍滑入系统,条形码棒连接到键盘用来扫描条形码的幻灯片。 条形码标识出现在监控和污渍的技术员表示已使用和分析运行在下滑。 通过这种方式,不同的污渍和在任何滑跑测试可以自由地混杂在一起。
  一旦所有的幻灯片加载,系统开始运行。 作为一个幻灯片,一个内部条形码扫描器识别它。 然后电脑将自动显微镜扫描滑动,同时内部的相机拍出来的相片重叠整个幻灯片,包括600 - 1000年个人显微镜领域。 接下来,计算机将图像缝合在一起成一个单一的数字图像。 每个相框的位置是已知的,因为埃西斯有一个准确的镜台。 这能够查看整个幻灯片内容改善人工显微镜检查的缺陷,一个病理学家必须移动幻灯片在舞台上用手,可能错过它的一部分。自动显微镜奥林巴斯4倍,10倍、20倍,40 x,x 60干燥的目的。 3-chip索尼相机设置以每秒60帧,逐行扫描方式消除振动噪声。 自动对焦与任何显微镜物镜允许无人操作。 翻译阶段移动幻灯片在三轴运动,扫描幻灯片在x,y和z轴的焦点。标准品
  电脑可以升级为最佳操作。 当前配置使用双重奔腾III 800 - MHz处理器和18 - 72 -千兆字节SCSI硬盘,512 mb内存,和Windows NT 4.0工作站。 一个不间断电源允许系统有序关闭,保护幻灯片上的标本的失败的力量。扫描幻灯片和建设数字图像的时候,电脑使用抓帧器从照相机捕捉单个帧,订餐,颜色阈值适用于他们通过将图像转换为hue-saturation-intensity空间。计算机分析框架,运用模式识别算法消除或排除无关的对象。 在应用模式识别算法,计算机应用的形态学算法,确定区域,长度、形状、和这些参数进一步描述细胞的组合。
  自最终分析取决于病理学家而不是仪器,识别可能的利益细胞的不同的标准将是慷慨的。 任何可能的系统使得一个形象是积极的,那么病理学家接受或拒绝图像基于临床经验和训练。 在组织的应用程序中,电脑商店的整个组织。审查。 幻灯片的内部处理后,病理学家评论17-in收集到的图像和定量信息。 平板电脑显示器(分辨率1280 x 1280,最好的光学分辨率大约是0.0625?m 2 每像素160 x 120每视野?m;见图3)。
  这个过程有所不同,基于非纯组织组织的应用程序和应用程序。 non-solid-tissue-based应用程序中,如检测和表征目标细胞在骨髓,埃西斯扫描幻灯片低倍镜下识别和计数目标感兴趣的细胞使用颜色。 怀疑细胞的位置存储为后续表征放大更高。 细胞被重新放大并具有额外的颜色和更高的形态学标准。 数字图像的收集细胞病理学家存储以供稍后查看。在组织的应用程序,如评价HER2的彩色幻灯片致癌基因表达,埃西斯系统产生一个组织学reconstruction-a整个组织的“卫星视图”一节。 病理学家选择感兴趣的区域组织重建的进一步分析。 选定的区域出现在高放大监控的多画面显示。 图4显示了病人的图像幻灯片在分析显示在屏幕上。
  病理学家检查高倍率图像并选择一个或多个条件进行详细地分析。 埃西斯立即计算每个像素的发色体颜色,将像素计数染色强度,提出了一种分数。 处理器可以区分256增加的强度为特定的颜色。 系统将分数转换,提出了一个连续体,从0.0到4.0,与定量在零点几单元。 积极染色细胞的百分比也报道,在适用情况下)。 换句话说,系统可以提供导致特定测量最常用的格式。
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