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IVD开发所需的自动图像分析
      
  自动图像分析技术提供标准化和定量测量组织中的蛋白表达。随着个性化的医药和有效的分子靶向疗法在地平线上,开发平移体外诊断,可以准确地选择具体的治疗或治疗方案的患者越来越严峻的承诺。两个最著名的例子在肿瘤检查雌激素受体和HER2的表达,采用免疫组织化学(IHC)预测他莫昔芬和赫赛汀(见图1)。作为测量固定组织中的表达,IHC保留组织结构和细胞形态,从而使蛋白表达的本地化。其他基因和蛋白表达的方法(例如,酶联免疫吸附,RTQ-PCR,基因芯片技术)相比,免疫组化还具有的优点是只需要少量的组织(5微米的边)进行测试所需的。其结果是,免疫组化已成为临床病理实验室中的支柱。
  然而,传统的IHC也有缺点。除了那些变异来源的困扰所有的组织为基础的方法(包括在固定的时间),进传统的免疫组化是定性的(非定量)的性质,可以是主观的。与IHC,病理学家评估多少蛋白质是通过本质的,棕色的强度的目测判定染色的组织中观察到(参见图1)。在一般情况下,得分的组织基于四个强度等级:IHC 0(负),IHC +1(低),IHC +2(中),和IHC +3(见图1)。
  比较传统的免疫组化与水族分析。顶面板:图像的传统IHC(褐变)指示标记,ER和HER2,和有代表性的典型的数据输出。底板:水分析的指示标记,ER和HER2,和有代表性的典型的数据输出图片(点击图片放大)。
  因此,重现性和病理学家,病理学家标准化得分是穷人。这个问题最突出,最近的研究显示,地方和中央之间的一致性较差实验室评估HER2 1,2此外,传统的基于chromagen的IHC缺乏其他方法(例如,免疫荧光)提供的动态范围。3然而,尽管有这些缺点,传统的免疫组化临床病理实验室组织为基础的诊断仍然是标准的护理。
  随着个性化的医药和有针对性的治疗,HistoRx公司公司(纽黑文,CT)的AQUA(自动定量分析)技术提供了一个解决方案,量化和标准化的生物标志物的表达在临床实验室分析,可以适应。AQUA技术的发明,以解决基于IHC检测。4 AQUA技术的缺点是荧光免疫组化实验为基础的方法,该方法提供了客观的和连续的组织,通过自动化的荧光显微镜和先进的图像分析算法(参见图1)的蛋白的表达分数。它采用分子鉴定室以量化作为一个像素强度在特定的组织或亚细胞功能的生物标志物的表达。AQUA分数先前已被证明是成正比的每单位面积的分子或蛋白质浓度,该方法可广泛应用于生物标志物的评估和临床特征。5-9
  由于疾病的复杂性,单一的生物标志物的方法往往会低于预测和预后提供一个稳定的水平,因此,多参数的诊断模型将被要求。在表达原位测量的情况下,电流测量的局限性使他们很难或不可能建立多变量模型。本文将讨论使用AQUA强大的临床诊断技术的发展潜力,特别是单因素和多因素预测模型的预测结果在多形性胶质母细胞瘤(GBM)研究发展。
  该技术的工作原理如何与其他成像分析系统在市场上相比,AQUA技术是包含在一个完整的平台解决方案,可以采取检测应用荧光免疫组化染色,通过图像采集和得分由AQUA分析。AQUA分析技术方法的基础上,条块分割,而不是基于分子形态或适应性训练算法。AQUA协议由三个主要部分组成:组织染色,图像采集和图像分析(条块和AQUA得分的)。虽然AQUA技术采用多个荧光染料,其类似于传统的免疫组化染色方法和可适应病理laboratoryís工作流程。
 
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