注:●代表高危型,共有 14 种。▲代表中等危险型,其余为低危型;CP8304 和 81 型基本等同,83 和 MM7 等同,82 和 ISO39、MM4 等同,84 和 MM8 等同,CNAD89 和 CP6108 等同。CP8304 为 MY09/11 扩增产物。
装量
采用分光光度计测量 30 个不同 HPV 基因型的重组质粒浓度,采用10 ng/ml 正常人基因组稀释,在通风橱中分装到 1.5ml 冻存管中,每管 100ul,每种不同 HPV 基因型的重组质粒浓度为 105~106 拷贝/ml,每套 30 支,各种型别的 HPV 基因型质粒各 1 管。分装好的放入-70℃冰箱中进行保存。
质量标准
1.阳性符合率:检测试剂盒检测范围内人乳头瘤病毒相应型别国家基因分型参考品,结果应均为阳性。
2.型特异性:检测试剂盒检测范围外人乳头瘤病毒相应型别国家基因分型参考品,高危型应不得出现交叉,低危型交叉反应率应分别不大于 15.0%(PCR-荧光法)、10.0% (PCR-杂交法等 PCR 杂交原理的方法),购买标准品、对照品就上【莱耀生物】。
3.重复性:检测 HPV 分型参考品高低危型各一个,每型别重复 10 次,批内精密度应符合 Ct 值的变异系数(CV,%)不大于 5.0%(PCR-荧光法);反应结果应一致、且均为阳性(PCR-杂交法等 PCR 杂交原理的方法)。
4.检测限:检测 HPV 分型参考品高低危型各一个,检测限应均不高于 104copies/ 反应。
注:如使用 HPV16 和 18 型,检测限应均不高于 104IU/ 反应。
保存条件: 应于-20℃以下储存,避免反复冻融。
注意事项: PCR 操作按照分区进行,使用带滤芯的枪头吸取,防止污染。稀释时应避免剧烈震荡。